纳米材料(NMs)因其所具有的独特性能而被广泛应用于日常生活的方方面面,然而,随着纳米技术的迅速发展,人们对纳米材料安全性及其生物效应的信息需求不断增加,纳米材料的毒性及其对环境的影响已经引起科学界和政府有关部们的重视。但通常传统毒性检测方法不仅需要标记细胞,还容易受到纳米材料特异性干扰的影响,造成假阴性或假阳性的检测结果。因此,开发一种可靠且经济高效的方法来评估纳米材料的毒性,对于正确识别其对人类健康的影响以及确保纳米技术的安全发展至关重要。
近期,发表在《Nature》上的一项研究中,调查了无标记阻抗流式细胞仪(Ampha Z32,瑞士)在体外纳米材料毒性筛选中的可靠性和适用性,并将其检测结果与台盼蓝(TB)染色排除法和常规流式细胞法(FC)的检测结果进行了比较。结果表明,Ampha Z32阻抗流式细胞仪与两种传统方法的检测结果一致,是一种稳定、可靠、无需标记且不易受到干扰的检测方法。
图1 不同频率下,失活细胞(绿色)与活性细胞(红色)的分离
图2 通过IFC检测的U937细胞对NM-300K(Ag,100μg/ mL)的急性毒性效应
活细胞(红色),暴露在NM-300K中10min(蓝色),暴露在NM-300K中30min(紫色)和坏死细胞(绿色)
图3 剂量反应曲线:TB&IFC分析
灰色虚为阴性对照,即健康细胞的平均值“SE”(%)。与对照组(0μg/ml)相比,单次方差分析(n≥3)结果显示,毒性效应具有统计性意义(P ≤ 0.05、**P ≤ 0.01和**P≤ 0.001)
图4 FC(常规流式细胞仪)& IFC(Ampha Z32阻抗流式细胞仪)测量结果对比
以上结果表明,IFC法无需染料/标记,不易受纳米特性的干扰,克服了传统活力分析的局限性,是一种高效、快速、环境友好且可靠的纳米毒性筛选工具。
原文:
Ostermann, M., Sauter, A., Xue, Y. et al. Label-free impedance flow cytometry for nanotoxicity screening. Sci Rep 10, 142 (2020).